製品情報

包装

猫。 なし。em101

発注情報:

ストレージ:アーゼ、- 20oのためのc1年間; 室温で他の人( 15- 25・度であり、 c) 一年間

説明

easypure®プラスミドキットminiprep用途、 修正されたアルカリ溶解法を隔離するために高- 品質からプラスミドdnaから・ル; 20ml( ポンド) または・ル; 4ml( プラスミドartmediatm培養) 文化細菌の細胞。 ユニークな定式溶解バッファーバッファと中和許可証- 誤差フリー視覚識別の完全な細菌細胞溶解と中和。 精製されたプラスミドdnaは様に適したの分子生物学的アプリケーション、 制限酵素消化を含む、 変革とdnaシーケンシング。

・雄牛; シンプルかつ高速な: 全体の手順で行うことができる20分。

・雄牛; 高収率: dnaまでもたらす40・ムー; g。

・雄牛; エラー- 自由な可視化: 着色された溶解と中和を視覚化するためにバッファ。

キットの内容

手順

1.一晩培養を追加し、 細菌のようにサスペンションのマイクロ遠心チューブ。

2.10遠心分離機で、 000・回; g1分間。 上清を破棄。

3.を追加の適切な音量rb( 混合された溶液は)、 細胞へresuspendペレットとそれによって完全にピペッティング。

4.ポンドの適切な音量を追加( 青)、 ミックスするとすぐに、 よくすすぐによってハンテン4- 6回チューブ。( この後一歩進んで、 lysate庄・ムー、 ldから変更するように不透明な明るい青です。 進みこのステップ5分以内に。)

5.nbの適切な音量を追加( 黄色)、 ミックスによってthroroughlyハンテン4- 6回チューブ。 が黄色に変わり、 lysateときに中和が完了しており、 黄色がかったフォームの沈殿物は。 をインキュベートするlysate2分間室温で。

6.12遠心分離機で、 000・回; g5分間。 上清転送にスピンカラム。

7.12遠心分離機で、 000・回; g1分間。 通って流れる廃棄します。

8.650を追加& ムー; lのwb( ことを確認するチェックをあなたが追加したエタノール) カラムに、 遠心分離機で12、 000・回; g1分間。 通って流れる廃棄します。

9.12で列空の遠心分離します、 000・回; g1〜2分間wbを除去するために完全に残留。

10。 場所でクリーンなスピンカラムのマイクロ遠心チューブ、 30から100を追加& ムー; lのebまたは滅菌、 蒸留水( ph> 7.0) センターに直接、 カラムのマトリックス( to収率を増加させる、 ebや水に予熱することが推奨される65oC)。 室温で列をインキュベートする1分間。 遠心分離機で列を10、 000・回; gに溶出1分間dna。 孤立したプラスミドdnaはすぐに使用できで保存できる、 または- 20・度; c。

ノート

・雄牛; 遠心分離工程すべてが行われて室温で。

・雄牛; ポンドまたはnbを添加した後に、、 荷役が穏やかでなければなりません。 活発なミックスゲノムdnaの混入をもたらすかもしれません。

・雄牛; すべてを追加しアーゼ( このキットに付属してい) にrbソリューション、 徹底的に混ぜる4およびストアにoc。

・雄牛; 使用する前に、 しているかどうかをチェックポンドは曇りやない、 は曇っている場合、 で、 それを加熱するために水浴37oc完全にそれを溶かす。 キャップを確保を避けるため、 使用後すぐにph変化。

・雄牛; このキットdna最大によって歩留まりは40・ムー; g。 プラスミドdna収量が低い場合、 細菌培養の音量を上げるまたは使用artmediatmプラスミド文化。 プラスミドdnaからの収率artmediatmプラスミド文化は明らかにポンド媒体からのそれよりも高い。

・雄牛; rbの量、 ポンドとnbにあるべき厳密に従って、 ユーザーマニュアル。 あまりにも多くの細胞培養溶解の不完全になる可能性が、 したがってプラスミドdna収量に影響を与えているおり、 純度。

援用

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