製品情報

包装

猫。 なし。cp101

発注情報:

ストレージ:2時- 8・度; cに6年

説明

artmediatmタンパク質発現のために設計されて高いタンパク質の歩留まりをはるかに少ない手- オンタイム。 タンパク質が誘導されることなく、 自動的に監視と誘導timeconsumingodiptgステップ。 単に接種する準備されたartmediatmコロニーと、 文化を育て収穫一夜と浄化のための細胞タンパク質。

キットの内容

発現ベクター:

lacオペロン- 調整された発現ベクター:peasy®-e1、peasy®-e2、 ペット、 pgex、 pmal

菌株:

Bl21、 bl21( de3)、 bl21( de3) plyss、トランスエッタ( de3)、 等。

手順

使用する前に、 の沈殿物がいるかどうかをチェック中に存在するam4.沈殿が表示される場合、 熱am437にoc水沈殿するまで入浴完全に溶解する。

1.am4am3( vにすべてを追加しam3:vam4=19:1)。 均一に完全なミックスを得るためにartmediatmタンパク質発現。 結果として生じる2月8日文化で保存することができoのためのc1ヶ月。

2.の適切な音量を追加artmediatm無菌培養容器に。 使うことをお勧めし培養培地の間にボリュームの1/101/5maxiumnの音量のフラスコ。

3.に基づいての抵抗値をベクトルとひずみ、 対応する文化への抗生物質を追加。 抗生物質の濃度、 推奨される次のようにリストされ:

アンペア+:50〜100・ムー; g/ml、 菅+:25から50・ムー; g/ml、 cm+:34・ムー; g/ml

4.接種プロトコル

のための培養液量30未満ミリリットル、 いくつかの植民地と直接セレクトを追加培地に表現を誘導するために。

のための培養液量30以上ミリリットル、 使用は、 次のメソッド:

A) がある場合は多くの植民地板の上に、 少しずつ注ぐボリュームで培地のプレート。 スプレッダーとスクレープコロニーとその後にそれらを追加artmediatmタンパク質発現。

ろ1-5%接種するボリュームの培地のの非- 誘発される( od始まる文化600>0.5)。

始まる文化準備: いくつかのピックを植民地へ出発文化抗生物質耐性対応するキャリング。 細胞培養odインキュベートするまで600>0.5.ポンド、 tbまたは任意の他の非- 誘導培地として使用することができスターターカルチャー、 が、artmediatmタンパク質発現はの使用は推奨されません。

5.インキュベートする37250で一晩に回転数oc。

ノート

・雄牛; わずかな沈殿am4が持つかもしれない、 パフォーマンスに影響を与えるのではないでしょう。 の沈殿物が観察される場合、 暖かい37年中のボトルは、oc水浴が沈殿物を溶解するために。

・雄牛;を追加し全体積のメディアにam4am3のための完全な。 のメディアで完全な4を保管してくださいoc1ヶ月まで。

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