製品情報

包装

猫。 なし。ee151

発注情報:

ストレージ:アーゼとプロテイナーゼk- 20でソリューションoのためのc1年間; 室温で他の人( 15- 25・度であり、 c) 一年間

説明

easypure®海洋動物のゲノムdnaキットを提供し簡単で便利な方法を隔離するために高品質までからゲノムdna30mg海洋動物。 動物の組織が乱れた液体窒素で粉砕することによって溶解させるし、 酵素的に。 dnaはきっとシリカ- ベースの列。 孤立したdnaは、 pcrに適した、 制限酵素消化と南部ブロッティング。

・雄牛; dnaまでもたらす15・ムー; g。

・雄牛; 完全な汚染物質の除去や阻害剤。

・雄牛; dna20から50キロバイトの範囲。

・雄牛; カラムベースの浄化、 有機溶媒抽出またはエタノール沈殿なし。

s十分な要件

suitable、 淡水または凍結組織、 凍結融解で繰り返しを避ける。

キットの内容

手順

を開始する前に、 を追加する48ミリリットル96-100%cb8wb8とするために、 それぞれエタノール。

遠心分離工程すべてが行われて室温で。 準備する55・度; ℃と70・度; 事前c槽内の水、 それぞれ。

1.場所・ル; 中にティッシュ30mgみじん切り、 無菌1.5mlのマイクロ遠心チューブ。

2.200を追加& ムー; lと20lb8・ムー; lアーゼをチューブに。 ボルテックス10秒間、 インキュベートする室温で2分間。

3.20を追加& ムー; プロテイナーゼkl管への。 ボルテックスにより完全に混和( を確保する組織は完全に浸漬した溶液中)。 インキュベートする55で専修度; cまで溶解が完全な。 インキュベーション時間貝のために組織は30分くらいとインキュベーションのための時間は周りに魚やエビ45分~2時間( インキュベーションを時間ものに依存し組織) が使用され。 ボルテックス繰り返し徹底したミックスするために必要です。

4.200を追加& ムー; lbb8管への、 すぐにボルテックス5秒間。 インキュベートする10分間70で専修度; c。

注: 白い大量の析出する形成することができるbbを追加した後8.それが消えインキュベーション後に70・度; しばらくc。 析出する場合の多くを出席している、 適切に増加してインキュベーション時間は避けることをお勧めし溶解の不完全につながる可能性どのdna品質の低下。 さらに、 が発生することがあり、 析出する冷却後に再び、 このように迅速が次のステップに進むが望まれて。

5.200を追加& ムー; l96-100%により完全に混和エタノール、 ボルテックス。

6.転送得られた溶液を含むdna凝集( おそらく存在) にスピンカラム。 遠心分離機で12、 30秒間000rpm、 捨てるか、 流れを通して-。

7.500を追加& ムー; lcb8( ことを確認するチェックをあなたが追加したエタノール使用前に)、 遠心分離機で12、 30秒間000rpm、 捨てるか、 流れを通して-。

8.step7一度リピート。

9.500を追加& ムー; lwb8( ことを確認するチェックをあなたが追加したエタノール使用前に)、 遠心分離機で12、 30秒間000rpm、 捨てるか、 流れを通して-。

10。 一度9ステップを繰り返し。 場所スピンカラムコレクションへチューブ。 遠心分離機で12、 ために2分間000rpm残留wb8完全に削除する。

11.空気乾燥スピンカラム室温で数分間。

12.スピンカラムを配置して無菌1.5mlでのマイクロ遠心チューブ。 50〜200を追加& ムー; lの溶出バッファ( に予熱され60・度であり、 c、 dnaを増大させることができる収率) または蒸留水( ph> 7.0) の中心部への列。 インキュベートする室温で1分間。 遠心分離機で12、 1分間000rpmに溶出をゲノムdna( を回復するためによりdnaを追加し、 ebまたは蒸留水再び第二溶出を実行するために)。 のための長期- 長期ストレージ、 店で精製したdna- 20・度; c

ノート

・雄牛; 品質を確保するためにdna、 新鮮なサンプルを必ず使用してくださいと凍結融解で繰り返しを避ける。 品質、 歩留まりと隔離されたdnaの種類によって異なりと年齢の出発物質。

・雄牛; あまりにも多くの起動を使用しないでください材料降る抽出性能に影響を与えます。

・雄牛; カットすることが重要です中にティッシュを小さなピース、 多くの時間を節約することができる組織の消化。 の量が小さいため、 サンプル使用、 それはすぐに解凍した計量中、 このように挽く液体窒素には推奨されません。

・雄牛; ユース滅菌チューブやピペットチップを避けるためにあらゆる汚染からdnase。

・雄牛; あなたを実行ステップ5月第二溶出同じものを使用しまたは異なるチューブのマイクロ遠心チューブ。

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